К.м.н. Г.И. Кричевская (Москва) от группы авторов представила доклад на тему «Иммуномодулирующее влияние герпесвирусных инфекций (ВПГ1, ВПГ2, ЦМВ, ВЭБ) на системную продукцию цитокинов и хемокинов при болезни Бехчета, протекающей с увеитом и без интраокулярного воспаления». Цель работы заключалась в анализе реактивации вируса простого герпеса 1 типа (ВПГ 1), вируса простого герпеса 2 типа (ВПГ 2), цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барра (ВЭБ) на системную продукцию цитокинов и хемокинов у пациентов с активными увеитами (УА), увеитами в стадии ремиссии (УР) и без поражения глаз (БПГ).
Исследования показали, что системная продукция иммуномедиаторов у пациентов с ББ и увеитами отличается от группы БПГ. Изменения наиболее выражены у пациентов с увеитами (УА, УР) и реактивацией ВПГ-инфекция (ВПГ-И) и касаются преимущественно хемокинов. В сравнении с больными без увеитов достоверно повышается уровень IFN-γ, провоспалительных хемокинов МСР-1, MIP1-α, MIP1-β, RANTES, IP-10, гомеостатического хемокина SDF-1α, транформирующих факторов роста TGF-α и TGF-β.
Ремиссия увеита у пациентов с реактивацией ВПГ-И сопровождается усилением продукции большего числа хемокинов, чем активный увеит. Кроме выявленных при УА, при УР повышается уровень еще двух провоспалительных хемокинов (GRO-α и Eotaxin) и IL-18.
Отличия в системной продукции цитокинов у пациентов с увеитами и хронической ВПГ-И выражены слабее: при УА повышен уровень только SDF-α, а при УР еще трех хемокинов: МСР-1, IP-10, MIP-1β.
Увеличение числа цитокинов и хемокинов у пациентов с УР по сравнению с УА не вполне ясно и возможно отражает их роль в поддержании клинической ремиссии.
Отсутствие выраженного влияния реактивации ВПГ-1 на продукцию хемокинов у пациентов с ББ без увеитов косвенно указывает на роль генетических факторов, а возможно и на влияние генетических вариаций у отдельных штаммов ВПГ в патогенезе внутриглазного воспаления.
К.м.н. Е.Б. Мякошина (Москва) от группы авторов выступила с докладом на тему «Клеточное микроокружение увеальной меланомы: клинико-патоморфологическое и иммуногистохимическое исследование». Микроокружение опухоли представляет собой современное направление исследований в фундаментальной онкологии. Новые тенденции изменения парадигмы противоопухолевого лечения включают перепрограммирование опухолевого окружения: ингибирование дифференцировки макрофагов, активацию противоопухолевых свойств иммунной системы, таргетное воздействие на опухоль-ассоциированные фибробласты, таргетное воздействие на гипоксию и ацидоз, ингибирование неоваскуляризации (таргетное воздействие на эндотелиальные клетки и перициты), таргетное воздействие на хроническое воспаление, таргетное воздействие на экзосомы, таргетное воздействие на экстрацеллюлярный матрикс.
Цель работы заключалась в изучении клинико-патоморфологических и мунногистохимических особенностей клеточного микроокружения увеальной меланомы малых и средних размеров. Основу проспективного исследования составляли результаты ликвидационного лечения увеальной меланомы малых и средних размеров в период 2005—2018 годы. Работа включала патоморфологическое исследование 43 энуклеированных глаз и 258 гистологических препаратов, иммуногистохимическое (ИГХ) исследование 24 энуклеированных глаза, 144 гистологических препаратов.
Проведенные впервые в России исследования клеточного микроокружения увеальной меланомы малых и средних размеров показали следующие результаты: лимфоциты определены в 100% случаев, макрофаги – в 46,5%, тучные клетки – в 41,9%, плазматические клетки – в 23,3%, фибробласты – в 18,6%, супрессорные клетки миелоидного происхождения: промиелоциты – в 16,3%, нейтрофилы – в 23,3%, эозинофилы – в 9,3%. Отмечены более высокие корреляционные связи эпителиоидноклеточного типа увеальной меланомы с наличием макрофагов и супрессорных клеток миелоидного происхождения. Выраженная степень пигментации коррелировала преимущественно с наличием тучных клеток, промиелоцитов, эозинофилов, фибробластов. Высокая степень васкуляризации меланомы коррелировала с наличием тучных клеток. Распространение опухолевых клеток по эмиссариям коррелировало с присутствием тучных клеток, промиелоцитов, эозинофилов, фибробластов.
Иммуногистохимическое исследование позволило выявить в ткани слабо и умеренно пигментированной увеальной меланомы абсолютное и относительное количество субпопуляций лимфоцитов со значимым преобладанием Т-цитотоксических CD3+ CD8+ CD28+ (p=0,018). При иммуногистохимическом исследовании экспрессируемых провоспалительными и проопухолевыми М2 макрофагами антигенов CD68+ и CD 163+ отмечено практически одинаковое их содержание (р=0,7). Выявление указанных клеток в микроокружении увеальной меланомы и их корреляция с неблагоприятными патоморфологическими симптомами опухоли может служить поводом для разработки новых стратегий сопроводительной таргетной терапии, направленной на элиминацию или перепрограммирование измененных клеток иммунитета и соединительной ткани.
К.м.н. Н.А. Осипова (Москва) от группы авторов представила доклад «Научно-теоретические успехи в изучении патогенеза ретинопатии недоношенных – основа для решения актуальных клинико-практических задач». Цель работы состояла в поиске новых молекулярных участников развития РН для построения патогенетически обоснованного базиса совершенствования скрининга, мониторинга, профилактики и лечения заболевания.
Объектом клинической части исследования явились недоношенные дети группы риска развития РН и с развившейся РН различного типа. Обследование включало динамическую офтальмоскопию и забор образцов венозной крови для иммунологического и биохимического исследования.
Объектом экспериментальной части исследования стали новорожденные крысята с экспериментальной РН. Проводились гистологические, иммуногистохимические и биохимические исследования стекловидного тела и сетчатки глаз животных, а также биохимические исследования образцов крови.
Как отметила докладчик, параллельное проведение в ходе работ клинических и экспериментальных исследований позволяет одновременно изучать как системные, так и местные факторы патогенеза РН, что обеспечивает целостность подхода к поиску новых перспективных для последующего практического применения участников патологического процесса, которые могут стать мишенью терапии и профилактики, либо маркером развития заболевания.
Известно, что развитие РН связано с нарушением ангиогенеза, а именно с задержкой и последующим аномальным ростом ретинальных сосудов у детей с незавершенным на момент рождения процессом васкуляризации сетчатки. Ангиогенез тонко регулируется сложной системой взаимодействующих ростовых факторов, цитокинов, биогенных аминов, многочисленных вазоактивных агентов, компонентов межклеточного матрикса. Изучение роли данных молекул в инициации нарушения процессов развития сосудов при РН и в ее прогрессировании является актуальной задачей. На сегодняшний день проведена оценка местного и системного уровня 49 цитокинов различного биологического действия, 4 монаминов и одного из важнейших компонентов ренин-ангиотензивной системы – ангиотензина II (АТ-II) на разных этапах развития патологического процесса в клинике и эксперименте. Динамическая оценка исследуемых параметров имеет принципиальное значение при поиске новых подходов к лекарственной терапии и профилактики РН вследствие фазности течения заболевания и, соответственно, разной роли вазоактивных молекул в разные фазы.
Исследователями изучено влияние мелатонина и синтезированных аналогов мелатонина на развитие патологической неоваскуляризации при РН в эксперименте; ведется работа по изучению механизмов выявленного влияния. Изучение патогенетической роли цитокинового профиля недоношенных позволило выделить ряд прогностических молекулярных маркеров развития РН, что является перспективным направлением в совершенствовании системы скрининга и мониторинга РН.
Данные, полученные в отношении норадреналина в эксперименте, позволяют предположить, что именно в первые две недели постнатального онтогенеза, когда его содержание в сетчатке крысят максимально, норадреналин играет особую роль в развитии сетчатки и ретинальных сосудов и может иметь важное значение в индукции патологического процесса при ЭРН. В клинике выявлена тенденция к повышению концентрации норадреналина в плазме крови детей с РН на сроке 36-39 недель ПКВ по сравнению с предыдущим сроком, что подтверждает его проангиогенные свойства.
В эксперименте показан недостаток системного уровня L-ДОФА на этапе инициации развития патологической вазопролиферации при ЭРН, отражающий его антиангиогенные свойства в данный ключевой период развития патологии и имеющий потенциально важное прогностическое значение, что требует дальнейшего изучения. В клинике свои антиангиогенные свойства выявил серотонин, уровень которого был достоверно снижен у детей с РН на момент манифестации по сравнению с детьми без РН. Статистическая обработка результатов позволила заключить, что низкое содержание серотонина (˂17,0 пг/мл) в сыворотке крови недоношенных детей на сроке 32-35 недель ПКВ может служить лабораторным критерием развития РН.
Таким образом, полученные в отношении патогенетических свойств моноаминов данные выявляют новые лабораторные маркеры РН (L-ДОФА, серотонин, норадреналин), а также открывают новые пути медикаментозной профилактики развития и прогрессирования патологии путем возможного влияния на уровень и активность данных факторов.
Данные в отношении ангиотензина II показали, что на 7-е сутки эксперимента, т.е. на сроке существования аваскулярных зон – на «доклинической» стадии, уровень АТ-II в сетчатке крысят опытной группы (0,19 пг/мл белка) был достоверно повышен по сравнению с данным показателем в группе контроля (0,12 пг/мл).
Полученные данные позволяют рассматривать AT-II в качестве потенциального прогностического лабораторного критерия скрининга заболевания, а также мишени для разработки новых методов медикаментозной профилактики развития РН, что безусловно требует проведения дальнейших исследований, учитывая влияние данного фактора на сосудистый тонус и риск развития серьезных побочных эффектов, связанных с применением его ингибиторов.

К.м.н. Н.Л. Лепарская
Завершил работу секции доклад к.м.н. Н.Л. Лепарской (Москва) на тему «Инновационные технологии в лечении пролиферативого синдрома при травме глаза (экспериментальное исследование)». Цель работы заключалась в разработке нового вида технологии контейнерной доставки лекарственных препаратов к заднему отрезку глаза с помощью липосом; в использовании адъюнктивной терапии (интравитреального введения), направленной на профилактику пролиферативных процессов заднего отрезка глаза.
Преимущества липосомальных форм лекарств: ФЛ нетоксичны, биодеградируемы; мембрана липосом может сливаться с клеточной мембраной, что обеспечивает внутриклеточную доставку их содержимого; вещество, заключенное в липосомы, защищено от воздействия ферментов, что увеличивает эффективность препаратов, которые подвергаются деструкции в биологических жидкостях; высвобождение лекарств из липосом происходит постепенно, чем достигается эффект пролонгированного действия; с помощью липосом можно осуществлять направленные транспорт лекарств к органу-мишени.
На различных этапах исследований был определен состав липосом, эндовитреальное введение которых является безопасным для тканей глаза. Создана новая ассоциативная форма липосом, нагруженных дексаметазоном, также не оказывающая изменений в структурах глаза. Доказана эффективность действия дипосом, нагруженных дексаметазоном, на модели ПВР, которое заключается в противовоспалительном и частично в антипролиферативном воздействии.
Также изучалось антипролиферативное действие препарата Мелфалан при экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии. Исследования продемонстрировали ингибирующее действие Мелфалана, однако отмечалось его ретинотоксическое действие, имеющее дозозависимый характер. Одним из методов уменьшения ретинотоксического действия является использование липосомальной системы лекарственной доставки препарата при интравитреальном введении.
Исследовалась эффективность липосом, ассоциированных с Мелфаланом 5 мкг с целью уменьшения ретиноксического эффекта и возможной пролонгации терапевтического действия препарата при лечении экспериментальной ПВР. Также оценивалась антипролиферативное действие Мелфалана в малых дозах на экспериментальную ПВР в отдаленном периоде (6 мес.), роль stealth-липосом 500 нм для профилактики развития побочного эффекта Мелфалана при лечении экспериментальной ПВР у кроликов по сравнению с использованием монопрепарата.
Результаты исследовательской работы показали, что использование Мелфалана при интравитреальном введении в малых дозах через 6 мес. продемонстрировало устойчивый антипролиферативный эффект: отсутствовала ПВР с развитием тракционной ОС, однако в отдаленном периоде и в дозе 2,5 мкг отмечалось образование единичных атрофических очагов в сетчатке.
Впервые установлено, что использование Мелфалана, загруженного в stealth-липосомы 500 нм, способствует минимизации ретинотоксического эффекта Мелфалана; отмечалось образование единичных атрофических очагов вблизи ДЗН.
Материал подготовил Сергей Тумар
Фото предоставлены оргкомитетом