В этом году тематическое пленарное заседание включало блок докладов, посвященных коморбидности при глаукоме — актуальной проблеме, отражающей современную тенденцию комплексного подхода к лечению пациентов, в том числе «семейными» врачами, в зону интересов которых включена самая разнообразная патология. В выступлениях Т.Н. Юрьевой, В.Э. Танковского, Ф.Е. Шадричева, Е.В. Мазановой, А.Ж. Фурсовой, М.А. Ковалевской, И.С. Белецкой были представлены сообщения, посвященные «синдромальной», увеальной, детской и юношеской глаукоме; рассмотрены особенности течения и лечения глаукомы при ее сочетании с возрастной макулярной дистрофией, токсикоаллергическими реакциями, сахарным диабетом и дефицитом витамина Д.
Работа конференции завершилась пленарным заседанием «Фундаментально-прикладные исследования в офтальмологии».
Президиум: профессор Л.А. Катаргина, академик РАН, профессор М.А. Островский (Москва), академик РАН, профессор Ю.А. Владимиров (Москва), кандидат биологических наук Н.В. Балацкая (Москва), профессор Н.Б. Чеснокова (Москва).
Академик РАН, профессор М.А. Островский (Москва)
Академик РАН М.А. Островский (Москва) осветил современное состояние нового направления в офтальмологии и физиологии зрения, основанного на использовании методов оптогенетики. Оптогенетика — междисциплинарное направление, объединяющее генную инженерию, оптику и физиологию. Задача оптогенетики — доставить в клетку ген светочувствительного белка как молекулярный «инструмент» управления ею. Первые и успешные с точки зрения возможности перехода к клиническим испытаниям шаги сделаны в отношении ганглиозных клеток дегенеративной сетчатки мышей (пигментный ретинит), которые удалось превратить в «псевдо-фоторецепторные» клетки с ON-OFF рецептивными полями, что принципиально важно для восстановления пространственного зрения. В докладе обсуждены вопросы выбора клеточных элементов дегенеративной сетчатки для ее оптогенетического протезирования, стратегии использования существующих и создания новых светочувствительных «инструментов» для оптогенетического протезирования, доставки и экспрессии гена (генов) при оптогенетическом протезировании сетчатки. Обсуждены перспективы применения оптогенетического подхода для протезирования дегенеративной сетчатки.
Академик РАН, профессор Ю.А. Владимиров (Москва)
Академик РАН, профессор Ю.А. Владимиров (Москва) выступил с докладом «Оксидативный стресс и болезни глаз». Оксидативный стресс — прямое повреждение метаболических путей вследствие активации свободно радикальных процессов, нарушение редокс-сигнализации. Чрезмерное производство активных форм кислорода и окислительный стресс играют важную роль в патогенезе многих возрастных глазных заболеваний и другой патологии переднего и заднего зрительного сегмента у взрослых. Реакции свободно радикального окисления (СРО) стимулируют смерть клеток посредством процесса апоптоза, участвуют в активации провоспалительных и проангиогенных путей и связаны с процессом аутофагии.
Глаз — один из главных органов мишеней оксидативного стресса. Далее докладчиком были рассмотрены вопросы о роли СРО в заболевании глаза, в частности, является ли болезнь следствием окислительного стресса или наоборот приводит к нему. Есть ли связь между клиническими проявлениями заболевания и маркерами окислительного стресса? В выступлении докладчиком были затронуты вопросы кинетики хемилюминесценции как метода изучения свободнорадикальных реакций. В заключение выступления академик РАН, профессор Ю.А. Владимиров пригласил участников заседания вступить в Общество медицинской биофизики.
Доклад профессора Н.Б. Чесноковой (Москва) был посвящен глазным проявлениям болезни Паркинсона. Были рассмотрены нарушения в различных звеньях зрительного анализатора при болезни Паркинсона. Особое внимание она обратила на роль дофамина в сетчатке и его влияние на внутриглазное давление. По данным ОКТ при болезни Паркинсона снижена толщина слоя нервных клеток, ганглионарных клеток, внутреннего и внешнего плексиформного слоя, увеличена толщина внутреннего ядерного слоя и уплощен верхнее-нижний наклон фовеа, снижены толщина и чувствительность роговицы. При болезни Паркинсона уменьшено время разрыва слезной пленки, изменены параметры реакции зрачка на различные стимулы, чаще возникает ядерная и задняя субкапсулярная катаракта, в хрусталике снижено содержание фермента глицеральдегида-3-фосфата дегидрогеназы, который участвует в формировании телец Леви, изменяется состав слезной жидкости. При болезни Паркинсона глаукома встречается в 2-4 раза чаще, чем в общей популяции. Представлены результаты исследования содержания катехоламинов в глазу мышей с моделью различных стадий болезни Паркинсона. Сделан вывод о том, что изучение глазных проявлений болезни Паркинсона может помочь в раннем выявлении этой патологии, с одной стороны, а также открыть новые механизмы возникновения нейродегенеративных процессов в глазу.
К.б.н. А.В. Кузнецова (Москва) рассказала о важной роли регуляции репрограммирования клеток пигментного эпителия сетчатки глаза человека in vitro. Клетки ретинального пигментного эпителия (РПЭ) участвуют в патогенезе многих дегенеративно-дистрофических и пролиферативных заболеваний сетчатки глаза человека. Жизненно необходимые для функционирования сетчатки клетки РПЭ, в норме высокоспециализированные и непролиферирующие, под влиянием патологических индукторов претерпевают морфологические, молекулярные и фенотипические изменения. Поиск механизмов репрограммирования РПЭ в условиях патологии представляет фундаментальный и практический интерес. Важнейшими регуляторами дифференцировки являются сигнальные пути, которые не только направляют развитие нейроэпителия глазного поля в нейроны сетчатки и клетки РПЭ, но и участвуют в развитии офтальмопатологии в глазу у взрослых. Цель исследования: изучение влияния белков bFGF, Wnt, участников ключевых сигнальных путей, на дифференцировку клеток пигментного эпителия сетчатки взрослого человека in vitro.
Результаты исследования возможности оценки гидратации роговицы и склеры с помощью терагерцового излучения были доложены профессором Е.Н. Иомдиной (Москва). Содержание воды в тканях играет определяющую роль в жизнедеятельности биологических систем, в том числе и в нормальном функционировании органа зрения. Основная часть воды в организме человека связана с соединительными тканями, способными удерживать воду благодаря наличию в межклеточном матриксе гликозаминогликанов. Нормальная роговица содержит около 78% воды, нормальная склера — около 65%. Для клинической оценки нарушений свойств роговицы и склеры информативным может быть определение гидратации этих тканей. Для этой цели представляется весьма перспективным использовать терагерцовое (ТГц) излучение. Цель исследования — изучить возможности использования ТГц сканирования роговицы и склеры для определения концентрации содержащейся в них воды. Впервые были созданы экспериментальные установки для исследования частотной зависимости коэффициента пропускания роговицы и склеры in vitro, а также зависимости коэффициента отражения этих тканей от процентного содержания в них воды в субТГц частотном диапазоне. Проведены также измерения спектра отражения целого глаза кролика в диапазоне 0,13-0,32 ТГц. Получены спектры пропускания роговицы и склеры, а также зависимость коэффициента отражения этих тканей от содержания воды. Выявлены отличия в исследуемых показателях между роговицей и склерой кролика, а также между склерой кролика и человека. Впервые полученные результаты показывают, что предложенный подход, сканирование роговицы и склеры с помощью электромагнитного излучения ТГц диапазона, может быть использован для создания устройства неинвазивного контроля степени гидратации этих оболочек глаза, имеющего потенциал широкой практической реализации в клинической офтальмологии.
А.С. Дубовиков (Санкт-Петербург) представил доклад «Культивированные на амниотической мембране лимбальные эпителиальные стволовые клетки при лечении лимбальной недостаточности в эксперименте». Одной из основных причин возникновения васкуляризированных бельм роговицы является гибель или дисфункция стволовых клеток роговичного эпителия, расположенных в роговичной части лимба. Данное состояние получило название лимбальной недостаточности (ЛН). Добиться прозрачности роговицы при ЛН возможно только после восстановления роговичного фенотипа эпителия. Чаще всего это лимбальная трансплантация в том или ином варианте. Лимбальная трансплантация обеспечивает частичный перенос лимбальных эпителиальных стволовых клеток (ЛЭСК) роговичного эпителия и является необходимым условием для восстановления роговичного фенотипа эпителия при ЛН. Трансплантация культивированных ЛЭСК, выделенных из биоптата здорового лимба и размноженных в питательной среде, приводит к успешному восстановлению роговичного эпителия при ЛН. В исследовании была подтверждена эффективность применения культивированных на АМ ЛЭСК в эксперименте. Необходимы последующие исследования для оценки морфологии роговицы и фенотипа роговичного эпителия, а также механизмов взаимодействия АМ с культивированными ЛЭСК и глазной поверхностью. АМ играет важную роль в использованной методике, поскольку обладает свойствами стимулировать нормальную эпителизацию и подавлять воспаление и образование рубцов за счет увеличения содержания коллагена, гиалуроновой кислоты, ингибиторов протеаз, цитокинов, факторов роста и других активных веществ. Отмечено, что в отсутствии стволовых клеток роговичного эпителия изолированное использование АМ в терапии ЛН не показало себя успешным.
В докладе члена-корреспондента РАН Е.И. Сидоренко, посвященном причинам задержки развития механизмов защиты сетчатки недоношенного ребенка от кислорода, отмечено, что у недоношенных детей как гипероксигенация, так и оксигенация с нормальным парциальным напряжением кислорода является большой нагрузкой для системы защиты от кислорода, приводящей к неадекватному ангиоспазму и развитию критической циркуляторной гипоксии. Сочетанная тяжелая патология ЦНС, бронхолегочной и сердечно-сосудистой систем приводят к нарушению процессов поступления кислорода в организм ребенка и доставки его к органам и тканям, гемодинамическим нарушениям, развитию циркуляторной гипоксии, способствуют задержке созревания механизмов защиты от кислорода тканей. Тяжелые сопутствующие заболевания задерживают созревание механизмов защиты тканей от кислорода у недоношенных детей. Кроме того, эти заболевания часто требуют пролонгированной оксигенотерапии и таким образом перегружают незрелую систему ауторегуляции сосудов, приводя к циркуляторной гипоксии, что необходимо учитывать в клинической практике.
В докладе к.б.н. Н.В. Балацкой «Цитокины как потенциальные биомаркеры сосудистой и нейродегенеративной офтальмопатологии» представлены результаты исследования системной и локальной продукции цитокинов пациентов с начальной и промежуточной стадиями ВМД для определения патогенетических значимых потенциальных биомаркеров заболевания. В слезной жидкости (СЖ) и сыворотке крови (СК) 60 человек, распределенных на 3 группы согласно клинической классификации AREDS, методом мультиплексного анализа на проточном цитометре определялись 16 цитокинов различного биологического действия: интерлейкины (IL1β, 2,4,6,8,10, 12, 18), интерфероны α и γ, факторы некроза опухолей α и β, факторы роста эндотелия сосудов VEGF-A и трансформирующий фактор роста TGFβ1. Анализировались частота выявления в тест-пробах (%) и концентрация иммуномедиаторов. Определены характерные локальные и системные сдвиги в цитокиновом статусе, выявлены ключевые медиаторы, изменение уровней которых в СК и СЖ ассоциировалось с возникновением и развитием ВМД. Сделан вывод, что значения концентраций цитокиновTGFβ1, IL1β и IL8 могут быть использованы для разработки подходов к прогнозированию риска возникновения заболевания, а определение уровней VEGF-A, IL1β иIL8в СК является высокоинформативным в прогнозировании перехода начальной в промежуточную стадию ВМД.
В докладе к.м.н. Г.И. Кричевской и соавторов «Бета- и гамма-герпесвирусы как факторы риска неходжкинских лимфом конъюнктивы и орбиты» представлены данные о роли β- и γ-герпесвирусов в патогенезе неходжкинских лимфом (НХЛ) конъюнктивы и орбиты, полученные при обследовании 16 пациентов с НХЛ и 16 — с заболеваниями конъюнктивы и орбиты разного генеза. В целом в 44% биоптатов выявлен геном вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), в 3 раза реже — ДНК вируса герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6), только в единичных случаях геномы других ВГЧ. Чаще всего ДНК ВЭБ (γ-герпесвирус) обнаружена в биоптатах НХЛ (56% образцов) по сравнению с заболеваниями другого генеза. У этих же пациентов отмечена самая высокая вирусная нагрузка. ВГЧ-6 (β-герпесвирус) выявлен при генерализованных формах НХЛ в сочетании с ВЭБ. ВГЧ-6 можно рассматривать как кофактор ВЭБ, способствующий или отражающий более тяжелое клиническое течение заболевания.
В докладе профессора И.П. Хорошиловой-Масловой и к.м.н. Н.Л. Лепарской «Изменения сетчатки при интравитреальном введении антипролиферативного препарата мелфалан (экспериментально-морфологическое исследование) представлены результаты экспериментально-морфологическое изучения изменений сетчатки при при интравитреальном введении антипролиферативного препарата мелфалан (20глаз). Показана основная мишень воздействия мелфалана — ретинальный пигментный эпителий, в котором накапливается мелфалан, что определяет нарушения метаболизма в наружных слоях сетчатки и развития атрофических процессов в них. Определена зависимость атрофических процессов в сетчатке от концентрации вводимого препарата. Изучена допустимая безопасная концентрация мелфалана (0,005 мг) для интравитреального введения.
В рамках конференции были проведены:
- заседание профильной комиссии по офтальмологии и детской офтальмологии при Экспертном совете Министерства здравоохранения Российской Федерации;
- сателлитные симпозиумы, на которых были представлены доклады и презентации известных специалистов-офтальмологов;
- выставка офтальмологического оборудования и инструментария, лекарственных препаратов от ведущих отечественных и зарубежных фирм-производителей.
Материал подготовила Лариса Тумар
Фотографии предоставлены Оргкомитетом конференции
